PCR原理是什么？其基本步骤如何？解释各步骤的目的。
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载体质粒 pBR325 共有三个选择性标记：Ap r、Tc r、Cm r 。它们分别含有一个单一酶切位点：PstI、SphI和EcoRI。若将一外源基因取代此载体上不含Cm r标记基因的 PstI-SphI 限制性 DNA 片段，那么用于转化子和重组子筛选的试剂应是 ( )
Ａ Ap Ｂ Tc Ｃ Cm Ｄ Ap + Tc Ｅ Ap + Cm
质粒的构建策略是什么？
